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如何保证CO2培养箱正常运转


   哺乳动物细胞的培养无疑是生物学研究中最重要的一环。哺乳动物细胞相对娇贵,需要特殊的培养环境。这一环境主要是由CO2培养箱来提供的。让你的CO2培养箱正常运作,远离污染,对细胞的成功培养尤为重要。以下建议来自Eppendorf的产品经理Charlie Villano。
避免污染
     哺乳动物细胞是在营养丰富的培养基中培养的,并且培养温度有利于几乎所有微生物的生长。尽管许多研究人员在培养基中加入抗生素或抗菌素,作为预防措施,但这并不能解决方法上的错误,反而掩盖了潜在的问题。如果可能的话,避免使用这些抗生素,不断改善你的无菌技术,来保持你的培养箱干净。
    微生物通常是“破门而入”。这虽然是显而易见的,但要完全避免,也没那么容易。在培养箱中放置东西时,一定要戴上手套,并尽量减少内层玻璃门打开的时间。经常用75%的乙醇擦拭门把手。保持湿度盘中的水清洁,每周更换。定期用肥皂和水清洗湿度盘,并用乙醇擦拭,或高压灭菌。如果培养基洒在了培养箱内,应取出层架彻底清洁。
   清洗工作的频率取决于你的培养箱使用得有多频繁。在大型实验室,培养箱需要经常清洗。如果你刚开始用一个干净的培养箱,又处处小心,那么它可在几周或几个月内保持干净。
保证CO2的水平
    大多数哺乳动物培养基使用碳酸氢盐缓冲系统。CO2是这一系统中的重要组成部分,必须保持在5%,以维持培养基的生理pH。尽管几乎所有的培养箱都配备CO2传感器,但随着时间的推移,校准会偏离设定点,需要操作人员直接测定CO2来重新校准。测定CO2水平的最简单、最准确方法是使用气体分析仪,如Fyrite装置。它们有专门测定CO2或O2水平的型号。
旧型号的培养箱可能需要更频繁的重新校准,而最新的型号每月会进行CO2传感器的自动归零。尽管这些型号几乎不需要手动校准,但用户也应当用Fyrite装置来检测培养室的CO2水平。
维持37℃
   哺乳动物细胞也和我们一样,喜欢37℃的温度。大部分CO2培养箱都配有显示器,报告内室的温度,但定期检查也是个不错的主意。使用一个高品质、已校准的温度计。将温度计贴在玻璃门的内侧,这样可以从外面读取温度,而不用打开玻璃门。在前一天下班前贴上。第二天一早,读取温度。重复多次,如果温度计很准的话,读数不是37℃,那就有必要重新校准温度传感器。
保持潮湿
   培养箱内部的温度相对较高,因此在没有高湿度的情况下培养基的蒸发将是个实际的问题。通过培养箱底部的湿度盘,可维持相对较高的湿度(90%~95%)。但缺点是,装满水的湿度盘也是个潜在的污染源。
    总之,定期维护和清洁是保持你的CO2培养箱正常运作并远离污染的最有效方法。

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